donor corneal tissue easily available for the eye departments with no availability of a tissue bank. However, the gamma-irradiated corneal tissue revealed serious structural damage and seems to be inappropriate for corneal stromal tissue sterilisation. Macroscopic analysis of lamellae and lenticulae irradiated by gamma irradiation showed deformation and yellowish colour with subsequent loss of their transparency. Te structure became more rigid with loss of the elasticity. Tis correlated with histological and electron microscopic analysis, which described damage of collagen fbrils in corneal stroma and loss of their regular arrangement. In ultrastructural analysis, we reached the same results as previously provided in a study by Chae et al. where the authors describe signifcantly lower collagen fbre density as well as collagen fbre thickness after gamma irradiation in comparison to the fresh corneas. In contrast with our study, they found no signifcant differences in transparency and elastic modulus between irradiated and fresh samples [17]. Tis could however be infuenced by a diferent dose of gamma irradiation, as the authors used a source of 17–23 kGy. Te glycerol storage has already been described by several studies, which came to conclusion that it is a safe method the storage of corneal tissue [16, 18]. Our results resembled the fndings of Liu et al., who described partial edema of collagen fbers, fused cavitation bubbles, and few keratocytes. Teir TEM analysis showed that the mean number of corneal collagen fbrils in the glycerol group was lower than in the in control group, but the diameter of the fbrils was almost unchanged. Tey attributed this to an incomplete dehydration or a short preservative period [18]. In our analysis, we also noticed slight diferences between the ultrastructure of glycerol-stored whole corneas and stromal lamellae. Te whole corneas had fryed and dehydrated stroma, while corneal stromal lamellae had good interfbrillar integrity. Te most simillar structure compared to fresh donor corneas was found in cryopreserved corneas stored in DMSO in -80 °C. Te tissue remained transparent and elastic thanks to the regular collagen network and no fbrillar damage. Corneas stored in glycerol did not lose their transparency, however there were distinct changes caused by glycerol dehydration. From our experiments, we can deduce that cryopreservation is a safe and appropriate method allowing long-term storage of the corneal stromal tissue. As far as we know, it has already been the most frequently used method in corneal lenticule storage and its successful reimplantation was proved in animal model as well as in human patients [9, 18]. Studies have proved that cryopreserved lenticules maintained their structural integrity of collagen fbres and cell viability [19]. We expect that the results with corneal stromal lamellae would be very similar to the experiments with stromal lenticules as the character of the tissue is the same, difering chiefy by the shape of the transplant. However, cryopreservation is appropriate only in cases when the viable endothelium is not required, because despite some successful cryopreserved corneal grafts, freezing has been shown to damage the endothelium [20, 21]. We are aware of the limitations of our study, such as small number of the samples. We were also limited by the gamma irradiation dose of 25 kGy, as it could be too high to aggravate the corneal structural changes after irradiation. Due to the analytical procedures, there was no possibility to examine the same cornea before and after the preservation process.

tejido corneal donado fácilmente disponible para los departamentos oftalmológicos sin disponibilidad de un banco de tejidos. Sin embargo, el El tejido corneal irradiado con rayos gamma reveló daños estructurales graves y parece ser inadecuado para la córnea. Esterilización del tejido estromal. El análisis macroscópico de laminillas y lentículas irradiadas por irradiación gamma mostró deformación y Color amarillento con posterior pérdida de su transparencia. La estructura se volvió más rígida con la pérdida de la elasticidad. Está correlacionado con histológico y electrónico. análisis microscópico, que describió el daño de las fbrillas de colágeno en el estroma corneal y la pérdida de su regular acuerdo. En el análisis ultraestructural llegamos al mismos resultados que los proporcionados anteriormente en un estudio de Chae et al. donde los autores describen una densidad de fibra de colágeno significativamente menor, así como un espesor de fibra de colágeno después irradiación gamma en comparación con las córneas frescas. En contraste con nuestro estudio, no encontraron diferencias significativas en la transparencia y el módulo elástico entre muestras irradiadas y frescas [17]. Sin embargo, esto podría ser influenciado por una dosis diferente de irradiación gamma, como los autores utilizaron una fuente de 17 a 23 kGy. El almacenamiento de glicerol ya ha sido descrito por varios estudios, que llegaron a la conclusión de que es un método seguro para el almacenamiento de tejido corneal [16, 18].Nuestros resultados se parecen a los hallazgos de Liu et al., quienes describieron edema parcial de fibras colágenas, burbujas de cavitación fusionadas y pocos queratocitos. Su análisis TEM mostró que la cantidad media de colágeno corneal Las fbrillas en el grupo de glicerol fueron menores que en el grupo de glicerol. grupo control, pero el diámetro de las fbrillas fue casi sin cambios. Lo atribuyeron a una deshidratación incompleta o a un período de conservación corto [18]. En En nuestro análisis, también notamos ligeras diferencias entre la ultraestructura de córneas enteras almacenadas en glicerol y laminillas estromales. Las córneas enteras estaban fritas y estroma deshidratado, mientras que las laminillas del estroma corneal tenían buena integridad interfibrilar. La estructura más similar en comparación con el donante fresco. córneas se encontraron en córneas criopreservadas almacenadas en DMSO a -80ºC. El tejido permaneció transparente y elástico gracias a la red regular de colágeno y no daño fbrilar. Las córneas almacenadas en glicerol no perdieron su transparencia, sin embargo hubo distintos cambios causados ​​por deshidratación de glicerol. De nuestros experimentos, podemos deducir que la criopreservación es un método seguro y apropiado que permite el almacenamiento a largo plazo del tejido del estroma corneal. Como Hasta donde sabemos, ya ha sido el más frecuente. método utilizado en el almacenamiento de lentículos corneales y su reimplantación exitosa se demostró en modelos animales, así como en en pacientes humanos [9, 18].Los estudios han demostrado que las lentículas criopreservadas mantuvieron su integridad estructural de fibras de colágeno y viabilidad celular [19]. esperamos que los resultados con laminillas del estroma corneal serían muy similar a los experimentos con lentículas estromales como el El carácter del tejido es el mismo, diferenciándose principalmente por el forma del trasplante. Sin embargo, la criopreservación es apropiada sólo en los casos cuando no se requiere el endotelio viable, porque A pesar de algunos injertos de córnea criopreservados exitosos, se ha demostrado que la congelación daña el endotelio [20, 21]. Somos conscientes de las limitaciones de nuestro estudio, como pequeño número de muestras. También estábamos limitados por el dosis de irradiación gamma de 25 kGy, ya que podría ser demasiado alta para agravar los cambios estructurales corneales después de la irradiación. Debido a los procedimientos analíticos, no hubo posibilidad de examinar la misma córnea antes y después de la proceso de preservación.